Upośledzona funkcja przywspółczulności zwiększa podatność na nieswoiste zapalenie jelit w mysim modelu depresji ad 7

Po drugie, jeśli rzeczywiście istnieje korelacja, wówczas depresyjni pacjenci z IBD mogą zostać wybrani do nowych strategii leczenia. Obejmują one nie tylko zastosowanie trójcyklicznych leków przeciwdepresyjnych, ale także zastosowanie wysoce selektywnych agonistów receptorów nikotynowych (22, 42. 44) lub, w odpowiednich przypadkach, stymulację nerwu błędnego, która jest obecnie oceniana pod kątem oporności na depresję i epilepsji (45, 46). ). Metody Zwierzęta. Samce C57BL / 6 (7. 9 tygodni) i samice C57BL / 6 w dniach 15. 16 ciążowych zakupiono od Taconic Farms Suppliers i utrzymywano w ośrodku opieki nad zwierzętami w McMaster University w warunkach specyficznych dla wolnych od patogenu. Tamy były trzymane indywidualnie. M-CSFa C57BL / 6c z niedoborem (op / op), jak również niehomozygotyczne + /. pary hodowlane zakupiono w The Jackson Laboratory. Myszy niehomozygotyczne (op / + lub + / +) są fenotypowo nieodróżnialne od siebie (w związku z tym oznaczone jako +/-). Myszy op / r mają osteopetrozy i brak zębów; dlatego karmiono je sproszkowaną dietą, podczas gdy + /. myszy otrzymały konwencjonalną żywność. Nie zaobserwowano różnic w spożyciu pokarmu i masie ciała pomiędzy tymi grupami. Myszy trzymano w standardowych warunkach przez co najmniej tydzień przed eksperymentowaniem. Wszystkie eksperymenty zostały zatwierdzone przez komitet ds. Etyki zwierzęcej Uniwersytetu McMaster i przeprowadzone zgodnie z kanadyjskimi wytycznymi dotyczącymi badań na zwierzętach. Deprywacja matki. Protokół MS zastosowany w niniejszym badaniu był niewielką modyfikacją wcześniej opublikowanego (23). Tamy i ich mioty przydzielono losowo do grupy kontrolnej (USA) lub grupy MS. Szczenięta MS były usuwane ze swoich klatek i tamy od P2 do P21 przez 180 minut dziennie, umieszczając je jako ściółkę w nowej klatce izolacyjnej. Klatki izolacyjne wyłożono warstwą wyściółki i utrzymywano w temperaturze 37 ° C. 5 ° C za pomocą podkładki grzewczej umieszczonej pod klatkami. Tamy z grupy MS zostały również usunięte z klatek domowych i przeniesione do oddzielnych klatek w trakcie procedury MS. Rękawiczki operatora zostały wcierane w ściółkę każdej ściółki przed dotykaniem młodych, aby zapobiec odrzuceniu przez tamy po zjednoczeniu. Amerykańskie mioty pozostawiono w spokoju, z wyjątkiem rutynowej opieki klatki przez technika. Po odsadzeniu (P22), potomstwo płci męskiej zidentyfikowano i zastosowano jako osobników w badaniu. Przedmioty ważono w P60. Wagotomia. Na P68 i P78 myszy MS i US znieczulono stosując ketaminę (150 mg / kg, ip, Bimeda-MTC) i ksylazynę (10 mg / kg, ip, Bayer HealthCare), a brzuszne i grzbietowe gałęzie tłokowe subdiagregatnej błędnicy były cięcie (1 cm powyżej połączenia żołądkowo-przełykowego). Wstępne badania wykazały wyraźne rozszerzenie żołądka u myszy w trybie wagotomicznym, a zatem do protokołu włączono chirurgiczną pyloplastykę. VXP były następnie wykonywane w tym samym znieczuleniu. Nie obserwowano poszerzenia żołądka u myszy poddawanych tej procedurze. U myszy operowanych pozornie pnie nerwu błędnego były podobnie odsłonięte, ale nie pocięte, ale wykonano liofilizację. Wszystkie myszy utrzymywano na normalnej diecie (z wyjątkiem myszy op / op, które otrzymywały sproszkowaną dietę). Walidacja wotomii. Ze względu na zastosowany krótki protokół integralności wagotomii w naszym badaniu nie mierzono testem oktapeptydu cholecystokininy. Kompletność wagotomii sprawdzono podczas sekcji zwłok nerwu błędnego podczas oględzin po mikroskopowych oględzinach związanych z wybielaniem srebrem w Bielschowskim (47). Krótko mówiąc, włókna nerwowe uczulono roztworem srebra. Skrawki potraktowano amoniakalnym srebrem, a następnie zredukowano do widocznego metalicznego srebra (dane nie pokazane). Przewlekły wlew icv i iniekcja ip. Pompy mikroosmotyczne (Alzet; Durect Corp.) napełniono nośnikiem (0,2% roztwór kwasu octowego) lub roztworem rezerpiny (1 lub 100 .g / dzień przez 14 dni). Dawki te zostały oparte na metodach opracowanych uprzednio w innym laboratorium dla przewlekłego infuzji icv u myszy (48). Pompy mikro-osmotyczne połączono rurką PE-60 o długości 1,5 do 2 cm z kaniulą o długości 3 mm (Plastics One) i wysterylizowano. W celu implantacji pompy myszy znieczulono ketaminą (150 mg / kg, ip, Bimeda-MTC) i ksylazyną (10 mg / kg, ip, Bayer HealthCare). Skórę ogolono, wykonano nacięcie wzdłuż linii środkowej, a czaszkę zdrapano z okostnej. Hemostaty zostały użyte do zrobienia kieszeni pod skórą między łopatkami. Mikrodrill został użyty do wywiercenia otworu w przybliżeniu 1,1 mm z boku i mm z ogona do bregmy. Minipompę umieszczono w kieszeni między łopatkami, kaniulę wprowadzono przez wywiercony otwór do komory bocznej, a cokół kaniuli przymocowano do czaszki klejem cyjanoakrylowym (Loctite)
[hasła pokrewne: ekspandowany co to znaczy, stomatologia na księżym młynie, igor michajłowski ]