RelA / p65 promuje różnicowanie osteoklastów poprzez blokowanie indukowanego przez RANKL apoptotycznego szlaku JNK u myszy ad 7

To nieprawidłowo aktywowane JNK powoduje rozszczepienie proapoptotycznego członka rodziny Bcl-2 Bid na aktywną postać jBid, co prowadzi do jego translokacji do mitochondriów i aktywacji szlaku kaspazy-3 (25). Stwierdziliśmy, że RANKL nie reguluje w górę Gadd45a, a także MKP5, w przypadku braku RelA i że aktywacja JNK jest ulepszona. Krótkoterminowa blokada aktywacji JNK zapobiega indukowanej przez RANKL apoptozie w prekursorach OC, umożliwiając ich różnicowanie, podobnie jak obniżenie poziomów Bid za pomocą siRNA. Jednak nie jesteśmy w stanie wykryć pojawienia się odszczepionych form oferty w naszym Rela. /. Prekursory OC, sugerujące, że mogą istnieć pewne różnice w szlakach z powodu linii komórkowej lub receptora inicjującego szlak. W kontekście anoikis (śmierć komórki wywołana brakiem adhezji), Bid można aktywować bez cięcia (26). W szlaku TNF zidentyfikowano ROS jako kluczowego mediatora przesłuchu między NF-kB i JNK (27). W sytuacjach upośledzenia sygnalizacji NF-kB, wytwarzanie ROS jest wymagane do apoptozy za pośrednictwem TNF. W linii OC jednak hamowanie ROS zmniejsza różnicowanie i resorpcję kości (28, 29). Aktywacja JNK jest również wymagana do różnicowania OC (30. 32). RANKL aktywuje zarówno ROS, jak i JNK, a te połączone szlaki przyczyniają się zarówno do różnicowania, jak i sygnałów apoptotycznych. W obecności RelA apoptoza jest tłumiona, a wytwarzanie OC jest optymalne, podczas gdy w przypadku braku RelA, prekursorowa apoptoza zmniejsza liczbę dojrzałych komórek resorbujących kość. Tak więc istnieje ścisły zakres aktywacji JNK wymagany do osteoklastogenezy, a RelA jest kluczowym komponentem w utrzymywaniu odpowiednich poziomów. Ponadto, hamowanie kaspaz lub JNK w ciągu pierwszych 2 dni hodowli RANKL przywraca różnicowanie w Rela. /. Prekursory OC, sugerujące, że czas aktywacji JNK może być równie ważny jak wielkość. Karin i współautorzy (33) wykazali, że aktywacja TNF-.-JNK indukuje apoptozę poprzez przyspieszenie obrotu białka regulowanego NF-kB c-FLIP, inhibitora kaspazy-8, poprzez regulację w górę ligazy ubikwitynowej E3 Itch. Jednak w Rela. /. Prekursory OC RANKL nie indukuje aktywacji kaspazy-8, więc jest mało prawdopodobne, aby c-FLIP i Itch były ważnymi mediatorami w odpowiedzi na RANKL. RelA i RelB wydają się mieć różne funkcje w linii OC. W przypadku braku RelA, prekursory OC łatwo ulegają apoptozie w odpowiedzi na RANKL, ale są zdolne do pełnego różnicowania i funkcji, jeśli śmierć komórki jest zablokowana. Przeciwnie, prekursory z niedoborem RelB nie są podatne na apoptozę za pośrednictwem RANKL, ale mają wady w różnicowaniu (21). Brak RelA nie wpływa na sygnalizację przez RelB, a nadekspresja tego ostatniego nie ratuje apoptotycznego Rela. /. fenotyp. Inną ważną różnicą między RelA i RelB jest kinetyka ich aktywacji przez RANKL. RelA aktywuje się w ciągu kilku minut od ekspozycji BMM na RANKL i jest względnie przejściowy, natomiast aktywacja RelB trwa kilka godzin i utrzymuje się przez kilka dni (DV Novack, niepublikowane obserwacje). To, czy różnice w funkcjach RelA i RelB leżą w ich mechanizmach kontroli (IKK. I NIK), czy też w strukturze samych podjednostek, pozostaje jeszcze do ustalenia. Wcześniejsze badania wykazały, że hamowanie klasycznego szlaku NF-kB blokuje zarówno zapalenie, jak i erozję kości w kilku modelach zapalenia stawów. Użyliśmy obecnie chimerów promieniotwórczych niosących szpik kostny od Rela. /. Tnfrl. /. myszy lub z Rela + / + Tnfr1. /. kontrole w modelu przenoszenia stawów w surowicy. Pomimo faktu, że komórki hematopoetyczne w tych RC nie są w stanie reagować bezpośrednio na TNF, zapalenie rozwija się z lub bez RelA. Jednak obecność RelA była krytyczna dla odpowiedzi OC. Liczba OC przylegających do zapalnej łuszczki na powierzchni kości i ich aktywność mierzona poziomami CTX w surowicy były zarówno wyraźnie stępione w Rela. /. RCs. Efekt ten jest najprawdopodobniej mediowany przez RANKL, w przeciwieństwie do innych cytokin obecnych podczas zapalenia stawów, ponieważ Rela . /. RC mają również słabą odpowiedź osteoklastogenną na wstrzyknięcie egzogennego RANKL. Podsumowując, wykazaliśmy, że pomimo braku domeny śmierci cytoplazmatycznej, RANK aktywuje szlak proapoptotyczny podobny do indukowanego przez TNFR1, z JNK, Bid i kaspazą 3 odgrywającymi kluczowe role. Podjednostka NF-kB RelA ma centralną funkcję specyficzną dla podjednostki w blokowaniu tej śmierci komórki, aby umożliwić różnicowanie, ale nie jest wymagana do transkrypcji genów wymaganych do osteoklastogenezy. Metody Myszy. Rela. /. Tnfr1. /. i odsyłać. /. myszy utrzymywano przez łączenie heterozygotów w specyficznym obiekcie wolnym od patogenów
[więcej w: fluomizin opinie, stomatologia na księżym młynie, ug zaleszany ]