Replikację niekompetentnego supernatantu wirusa dodawano do BMM przez 24 godziny, razem z 4 .g / ml polibrenu (Sigma-Aldrich), przed selekcji blastocydiną (1 .g / ml) przez 3 dni. Przetrwałe, poddane transdukcji BMM hodowano następnie w podobny sposób jak pierwotne, niemanipulowane BMM. siRNA dla Bid zostały zaprojektowane przy użyciu strony internetowej Dharmacon (http://www.dharmacon.com/DesignCenter) i sklonowane jako mała spinka do wektora retrowirusowego pSuper zawierającego promotor U6. Sekwencja SiBid1 pochodzi z 3. region nieulegający translacji to 5-CAGCTTGAGTGTATCTG...
Replikację niekompetentnego supernatantu wirusa dodawano do BMM przez 24 godziny, razem z 4 .g / ml polibrenu (Sigma-Aldrich), przed selekcji blastocydiną (1 .g / ml) przez 3 dni. Przetrwałe, poddane transdukcji BMM hodowano następnie w podobny sposób jak pierwotne, niemanipulowane BMM. siRNA dla Bid zostały zaprojektowane przy użyciu strony internetowej Dharmacon (http://www.dharmacon.com/DesignCenter) i sklonowane jako mała spinka do wektora retrowirusowego pSuper zawierającego promotor U6. Sekwencja SiBid1 pochodzi z 3. region nieulegający translacji to 5-CAGCTTGAGTGTATCTG...
Stężenie mikroorganizmów uznanych za klinicznie istotne dla potencjalnego rozpoznania zapalenia płuc wynosiło ponad 103 jednostek tworzących kolonie na mililitr płynu płuczącego oskrzelowo-pęcherzykowego. Rozpoznanie pneumokokalne post hoc przeprowadzono na podstawie kombinacji już wymienionych kryteriów klinicznych z mikrobiologicznymi dowodami infekcji bakteryjnych. Kryteria te były podobne do tych, które stosowano w przypadku zapalenia płuc związanego z wentylacją przez Pugina i współpracowników.19 Zapalenie płuc uznano za nieobecne, gdy ustalono alternatywną ...
